Hint Yarımadası'nda kala-azar olarak bilinen viseral leishmaniasis (VL), kamçılı protozoon Leishmania'nın neden olduğu ve zamanında tedavi edilmezse ölümcül olabilen parazitik bir hastalıktır. Kum sineği Phlebotomus argentipes, Güneydoğu Asya'da VL'nin tek doğrulanmış vektörüdür ve burada sentetik bir insektisit olan iç mekan kalıntı ilaçlaması (IRS) ile kontrol edilmektedir. VL kontrol programlarında DDT kullanımı, kum sineklerinde direnç gelişmesine yol açmıştır, bu nedenle DDT'nin yerini alfa-siypermethrin insektisiti almıştır. Bununla birlikte, alfa-siypermethrin DDT'ye benzer şekilde etki eder, bu nedenle bu insektisite tekrar tekrar maruz kalmanın neden olduğu stres altında kum sineklerinde direnç riski artar. Bu çalışmada, CDC şişe biyolojik testini kullanarak yabani sivrisineklerin ve F1 yavrularının duyarlılığını değerlendirdik.
Hindistan'ın Bihar eyaletinin Muzaffarpur bölgesindeki 10 köyden sivrisinek topladık. Sekiz köyde yüksek etkili sivrisinek ilacı kullanılmaya devam edildi.sipermetrinİç mekan ilaçlaması için, bir köy yüksek etkili sipermetrin kullanımını durdurdu ve bir köy ise yüksek etkili sipermetrin kullanımını hiç bırakmadı. Toplanan sivrisinekler, önceden tanımlanmış bir tanı dozuna belirli bir süre boyunca (40 dakika boyunca 3 μg/ml) maruz bırakıldı ve maruz kalmadan 24 saat sonra bayılma oranı ve ölüm oranları kaydedildi.
Yabani sivrisineklerin öldürme oranları %91,19 ile %99,47 arasında, F1 nesillerinin öldürme oranları ise %91,70 ile %98,89 arasında değişmiştir. Maruz kalmadan 24 saat sonra, yabani sivrisineklerin ölüm oranı %89,34 ile %98,93 arasında, F1 nesillerinin ölüm oranı ise %90,16 ile %98,33 arasında değişmiştir.
Bu çalışmanın sonuçları, P. argentipes'te direnç gelişebileceğini göstermekte olup, ortadan kaldırma sağlandıktan sonra kontrolü sürdürmek için sürekli izleme ve dikkatli olunması gerektiğini ortaya koymaktadır.
Hint Yarımadası'nda kala-azar olarak bilinen viseral leishmaniasis (VL), kamçılı protozoon Leishmania'nın neden olduğu ve enfekte dişi kum sineklerinin (Diptera: Myrmecophaga) ısırığıyla bulaşan parazitik bir hastalıktır. Kum sinekleri, Güneydoğu Asya'da VL'nin tek doğrulanmış vektörüdür. Hindistan, VL'yi ortadan kaldırma hedefine yaklaşmıştır. Bununla birlikte, ortadan kaldırma sonrasında düşük insidans oranlarını korumak için, potansiyel bulaşmayı önlemek amacıyla vektör popülasyonunu azaltmak kritik önem taşımaktadır.
Güneydoğu Asya'da sivrisinek kontrolü, sentetik insektisitler kullanılarak iç mekan kalıcı püskürtme (IRS) yoluyla gerçekleştirilir. Gümüşbacaklıların gizli dinlenme davranışı, onları iç mekan kalıcı püskürtme yoluyla insektisit kontrolü için uygun bir hedef haline getirir [1]. Hindistan'daki Ulusal Sıtma Kontrol Programı kapsamında diklorodifeniltrikloroetan (DDT) ile yapılan iç mekan kalıcı püskürtme, sivrisinek popülasyonlarının kontrolünde ve VL vakalarının önemli ölçüde azaltılmasında önemli yayılma etkilerine sahip olmuştur [2]. VL'nin bu plansız kontrolü, Hindistan VL Eradikasyon Programı'nı gümüşbacaklıların kontrolünde birincil yöntem olarak iç mekan kalıcı püskürtmeyi benimsemeye yöneltmiştir. 2005 yılında Hindistan, Bangladeş ve Nepal hükümetleri, 2015 yılına kadar VL'yi ortadan kaldırma hedefiyle bir mutabakat zaptı imzalamıştır [3]. Vektör kontrolü ve insan vakalarının hızlı teşhis ve tedavisi kombinasyonunu içeren eradikasyon çabaları, 2015 yılına kadar konsolidasyon aşamasına girmeyi hedeflemiş, bu hedef daha sonra 2017 ve ardından 2020 olarak revize edilmiştir [4]. İhmal edilen tropikal hastalıkları ortadan kaldırmaya yönelik yeni küresel yol haritası, VL'nin 2030 yılına kadar ortadan kaldırılmasını içeriyor.[5]
Hindistan BCVD'nin ortadan kaldırılmasının ardından gelen aşamaya girerken, beta-sipermetrine karşı önemli bir direnç gelişmemesini sağlamak zorunludur. Direncin nedeni, hem DDT hem de sipermetrinin aynı etki mekanizmasına sahip olması, yani VGSC proteinini hedef almalarıdır[21]. Bu nedenle, kum sineklerinde direnç gelişme riski, yüksek derecede etkili sipermetrine düzenli maruz kalmanın neden olduğu stres nedeniyle artabilir. Bu nedenle, bu insektisite dirençli potansiyel kum sineği popülasyonlarını izlemek ve belirlemek zorunludur. Bu bağlamda, bu çalışmanın amacı, Chaubey ve ark. [20] tarafından belirlenen tanısal dozlar ve maruz kalma süreleri kullanılarak yabani kum sineklerinin duyarlılık durumunu izlemektir. Chaubey ve ark., Hindistan'ın Bihar eyaletinin Muzaffarpur bölgesindeki farklı köylerden (sürekli IPS köyleri) sipermetrinle işlem görmüş kapalı alan püskürtme sistemleri kullanan P. argentipes'i incelemiştir. CDC şişe biyolojik test yöntemi kullanılarak, sipermetrinle işlem görmüş iç mekan ilaçlama sistemlerini kullanmayı bırakmış köylerden (eski IPS köyleri) ve sipermetrinle işlem görmüş iç mekan ilaçlama sistemlerini hiç kullanmamış köylerden (IPS olmayan köyler) alınan yabani P. argentipes'in duyarlılık durumu karşılaştırıldı.
Çalışma için on köy seçildi (Şekil 1; Tablo 1). Bunlardan sekizinde sentetik piretroidlerin (hipermetrin; sürekli hipermetrin köyleri olarak adlandırılan) sürekli iç mekan püskürtmesi geçmişi vardı ve son 3 yılda en az bir VL vakası görülmüştü. Çalışmada kalan iki köyden biri, beta-siypermethrin'in iç mekan püskürtmesini uygulamayan (iç mekan püskürtmesi yapmayan köy) kontrol köyü olarak, diğeri ise aralıklı olarak beta-siypermethrin'in iç mekan püskürtmesini uygulayan (aralıklı iç mekan püskürtme köyü/eski iç mekan püskürtme köyü) kontrol köyü olarak seçildi. Bu köylerin seçimi, Sağlık Bakanlığı ve İç Mekan Püskürtme Ekibi ile koordinasyon ve Muzaffarpur Bölgesi'ndeki İç Mekan Püskürtme Mikro Eylem Planı'nın doğrulanmasına dayanmaktadır.
Çalışmaya dahil edilen köylerin konumlarını gösteren Muzaffarpur bölgesinin coğrafi haritası (1-10). Çalışma yerleri: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Harita, QGIS yazılımı (sürüm 3.30.3) ve Open Assessment Shapefile kullanılarak hazırlanmıştır.
Maruz kalma deneyleri için şişeler, Chaubey ve ark. [20] ve Denlinger ve ark. [22] yöntemlerine göre hazırlandı. Kısaca, 500 mL'lik cam şişeler deneyden bir gün önce hazırlandı ve şişelerin iç duvarı, belirtilen insektisit (α-sipermetrin tanı dozu 3 μg/mL idi) ile kaplandı; bunun için insektisitin aseton çözeltisi (2,0 mL) şişelerin dibine, duvarlarına ve kapağına uygulandı. Daha sonra her şişe 30 dakika boyunca mekanik bir silindir üzerinde kurutuldu. Bu süre zarfında, asetonun buharlaşmasına izin vermek için kapak yavaşça açıldı. 30 dakika kuruduktan sonra kapak çıkarıldı ve tüm aseton buharlaşana kadar şişe döndürüldü. Şişeler daha sonra gece boyunca kurumaya bırakıldı. Her tekrarlanan test için, kontrol olarak kullanılan bir şişe 2,0 mL aseton ile kaplandı. Tüm şişeler, Denlinger ve ark. tarafından açıklanan prosedüre göre uygun şekilde temizlendikten sonra deneyler boyunca yeniden kullanıldı. ve Dünya Sağlık Örgütü [ 22 , 23 ].
Böcek ilacı hazırlandıktan sonraki gün, kafeslerden 30-40 adet yabani sivrisinek (aç bırakılmış dişi) şişelere alınarak her bir şişeye nazikçe üflendi. Kontrol grubu da dahil olmak üzere, her bir böcek ilacı kaplı şişe için yaklaşık aynı sayıda sinek kullanıldı. Bu işlem her köyde en az beş ila altı kez tekrarlandı. Böcek ilacına 40 dakika maruz kaldıktan sonra, etkisiz hale gelen sinek sayısı kaydedildi. Tüm sinekler mekanik bir aspiratörle yakalandı, ince ağla kaplı yarım litrelik karton kaplara konuldu ve aynı nem ve sıcaklık koşullarında, aynı besin kaynağıyla (yüzde 30 şeker çözeltisine batırılmış pamuk topları) ayrı bir kuluçka makinesine yerleştirildi. Ölüm oranı, böcek ilacına maruz kaldıktan 24 saat sonra kaydedildi. Tüm sivrisinekler tür kimliğini doğrulamak için incelendi. Aynı işlem F1 yavru sineklerle de uygulandı. Etkisiz hale gelme ve ölüm oranları, maruz kaldıktan 24 saat sonra kaydedildi. Kontrol şişelerindeki ölüm oranı %5'ten az ise, tekrarlarda ölüm oranı düzeltmesi yapılmadı. Kontrol şişesindeki ölüm oranı %5'ten büyük veya eşit ve %20'den küçük veya eşit ise, o tekrarın test şişelerindeki ölüm oranı Abbott formülü kullanılarak düzeltildi. Kontrol grubundaki ölüm oranı %20'yi aşarsa, tüm test grubu atıldı [24, 25, 26].
Vahşi doğadan yakalanan P. argentipes sivrisineklerinin ortalama ölüm oranı. Hata çubukları, ortalamanın standart hatalarını temsil eder. İki kırmızı yatay çizginin grafikle kesişmesi (sırasıyla %90 ve %98 ölüm oranı), direncin gelişebileceği ölüm aralığını gösterir.[25]
Vahşi ortamdan yakalanan P. argentipes'in F1 yavrularının ortalama ölüm oranı. Hata çubukları ortalama standart hatalarını temsil eder. İki kırmızı yatay çizgiyle (sırasıyla %90 ve %98 ölüm oranı) kesişen eğriler, direncin gelişebileceği ölüm oranı aralığını temsil eder[25].
Kontrol/IRS uygulanmayan köydeki (Manifulkaha) sivrisineklerin insektisitlere karşı oldukça hassas olduğu tespit edildi. Vurulma ve maruz kalmanın ardından 24 saat sonra vahşi doğadan yakalanan sivrisineklerin ortalama ölüm oranı (±SE) sırasıyla %99,47 ± 0,52 ve %98,93 ± 0,65 iken, F1 yavrularının ortalama ölüm oranı sırasıyla %98,89 ± 1,11 ve %98,33 ± 1,11 idi (Tablolar 2, 3).
Bu çalışmanın sonuçları, piretroid (SP) α-sipermetrinin rutin olarak kullanıldığı köylerde gümüş bacaklı kum sineklerinin sentetik piretroid (SP) α-sipermetrine karşı direnç geliştirebileceğini göstermektedir. Buna karşılık, IRS/kontrol programı kapsamına girmeyen köylerden toplanan gümüş bacaklı kum sineklerinin oldukça duyarlı olduğu bulunmuştur. Yabani kum sineği popülasyonlarının duyarlılığının izlenmesi, kullanılan insektisitlerin etkinliğinin izlenmesi açısından önemlidir, çünkü bu bilgi insektisit direncini yönetmeye yardımcı olabilir. Bihar'ın endemik bölgelerindeki kum sineklerinde, bu insektisit kullanılarak yapılan IRS'den kaynaklanan tarihsel seçilim baskısı nedeniyle düzenli olarak yüksek düzeyde DDT direnci bildirilmiştir [ 1 ].
P. argentipes'in piretroidlere karşı oldukça hassas olduğunu bulduk ve Hindistan, Bangladeş ve Nepal'deki saha denemeleri, IRS'nin sipermetrin veya deltametrin ile birlikte kullanıldığında yüksek entomolojik etkinliğe sahip olduğunu gösterdi [19, 26, 27, 28, 29]. Son zamanlarda Roy ve ark. [18], P. argentipes'in Nepal'de piretroidlere karşı direnç geliştirdiğini bildirdi. Saha duyarlılık çalışmamız, IRS'ye maruz kalmamış köylerden toplanan gümüş bacaklı kum sineklerinin oldukça hassas olduğunu, ancak aralıklı/eski IRS ve sürekli IRS köylerinden toplanan sineklerin (Anandpur-Haruni'den gelen kum sinekleri hariç, ölüm oranı %90 ile %97 arasında değişiyordu; Anandpur-Haruni'den gelen kum sineklerinde ise maruziyetten 24 saat sonra ölüm oranı %89,34 idi) oldukça etkili sipermetrine karşı muhtemelen dirençli olduğunu gösterdi [25]. Bu direncin gelişmesinin olası bir nedeni, endemik bölgelerde/bloklarda/köylerde kala-azar salgınlarını yönetmek için standart prosedürler olan iç mekan rutin ilaçlama (IRS) ve vaka bazlı yerel ilaçlama programlarının uyguladığı baskıdır (Salgın Araştırması ve Yönetimi için Standart İşletim Prosedürü [30]). Bu çalışmanın sonuçları, son derece etkili sipermetrine karşı seçici baskının gelişmesine dair erken göstergeler sağlamaktadır. Ne yazık ki, CDC şişe biyolojik testi kullanılarak elde edilen bu bölgeye ait tarihsel duyarlılık verileri karşılaştırma için mevcut değildir; önceki tüm çalışmalar, P. argentipes duyarlılığını DSÖ insektisit emdirilmiş kağıt kullanarak izlemiştir. DSÖ test şeritlerindeki insektisitlerin tanısal dozları, sıtma vektörlerine (Anopheles gambiae) karşı kullanım için önerilen insektisit tanımlama konsantrasyonlarıdır ve bu konsantrasyonların kum sineklerine uygulanabilirliği belirsizdir çünkü kum sinekleri sivrisineklerden daha az sıklıkla uçarlar ve biyolojik testte substratla daha fazla zaman geçirirler [23].
Sentetik piretroidler, 1992'den beri Nepal'in VL endemik bölgelerinde, kum sineği kontrolü için SP'ler alfa-siypermethrin ve lambda-sihalotrin ile dönüşümlü olarak kullanılmaktadır [31] ve deltamethrin de 2012'den beri Bangladeş'te kullanılmaktadır [32]. Sentetik piretroidlerin uzun süredir kullanıldığı bölgelerdeki gümüş bacaklı kum sineklerinin yabani popülasyonlarında fenotipik direnç tespit edilmiştir [18, 33, 34]. Hint kum sineğinin yabani popülasyonlarında eş anlamlı olmayan bir mutasyon (L1014F) tespit edilmiş ve DDT'ye dirençle ilişkilendirilmiştir; bu da piretroid direncinin moleküler düzeyde ortaya çıktığını düşündürmektedir, çünkü hem DDT hem de piretroid (alfa-siypermethrin) böcek sinir sistemindeki aynı geni hedef almaktadır [17, 34]. Bu nedenle, sipermetrin duyarlılığının sistematik olarak değerlendirilmesi ve sivrisinek direncinin izlenmesi, eradikasyon ve eradikasyon sonrası dönemlerde hayati önem taşımaktadır.
Bu çalışmanın potansiyel bir sınırlaması, duyarlılığı ölçmek için CDC şişe biyolojik testini kullanmış olmamızdır, ancak tüm karşılaştırmalar WHO biyolojik test kiti kullanan önceki çalışmalardan elde edilen sonuçları kullanmıştır. İki biyolojik testin sonuçları doğrudan karşılaştırılabilir olmayabilir çünkü CDC şişe biyolojik testi tanı döneminin sonunda bayılmayı ölçerken, WHO kiti biyolojik testi maruziyetten 24 veya 72 saat sonra (ikincisi yavaş etkili bileşikler için) ölüm oranını ölçmektedir [35]. Bir diğer potansiyel sınırlama ise bu çalışmadaki IRS köylerinin sayısının, bir IRS uygulanmayan ve bir IRS uygulanmayan/eski IRS köyüyle karşılaştırılmasıdır. Bir ilçedeki bireysel köylerde gözlemlenen sivrisinek vektör duyarlılık seviyesinin, Bihar'daki diğer köyler ve ilçelerdeki duyarlılık seviyesini temsil ettiğini varsayamayız. Hindistan lösemi virüsünün ortadan kaldırılmasının ardından gelen aşamaya girerken, önemli direnç gelişimini önlemek zorunludur. Farklı ilçelerden, bloklardan ve coğrafi alanlardan kum sineği popülasyonlarında direncin hızlı bir şekilde izlenmesi gerekmektedir. Bu çalışmada sunulan veriler öncül niteliktedir ve düşük kum sineği popülasyonlarını korumak ve lösemi virüsünün ortadan kaldırılmasını desteklemek için vektör kontrol programlarını değiştirmeden önce, bu alanlardaki P. argentipes'in duyarlılık durumu hakkında daha spesifik bir fikir edinmek için Dünya Sağlık Örgütü [35] tarafından yayınlanan tanımlama konsantrasyonlarıyla karşılaştırılarak doğrulanmalıdır.
Lökoz virüsünün vektörü olan P. argentipes sivrisineği, oldukça etkili sipermetrine karşı direncin erken belirtilerini göstermeye başlayabilir. Vektör kontrol müdahalelerinin epidemiyolojik etkisini sürdürmek için P. argentipes'in yabani popülasyonlarında insektisit direncinin düzenli olarak izlenmesi gereklidir. İnsektisit direncini yönetmek ve Hindistan'da lökoz virüsünün ortadan kaldırılmasını desteklemek için farklı etki mekanizmalarına sahip insektisitlerin rotasyonu ve/veya yeni insektisitlerin değerlendirilmesi ve tescili gerekli ve önerilmektedir.
Yayın tarihi: 17 Şubat 2025