Hint yarımadasında kala-azar olarak bilinen visseral leishmaniasis (VL), kamçılı protozoan Leishmania'nın neden olduğu ve derhal tedavi edilmezse ölümcül olabilen bir paraziter hastalıktır. Kum sineği Phlebotomus argentipes, Güneydoğu Asya'da VL'nin tek doğrulanmış vektörüdür ve burada sentetik bir böcek ilacı olan iç mekan kalıntı püskürtme (IRS) ile kontrol edilir. VL kontrol programlarında DDT kullanımı kum sineklerinde direnç gelişmesine neden olmuştur, bu nedenle DDT, alfa-sipermetrin böcek ilacı ile değiştirilmiştir. Ancak alfa-sipermetrin, DDT'ye benzer şekilde etki eder, bu nedenle kum sineklerinde direnç riski, bu böcek ilacına tekrar tekrar maruz kalmanın neden olduğu stres altında artar. Bu çalışmada, CDC şişe biyolojik analizini kullanarak vahşi sivrisineklerin ve F1 yavrularının duyarlılığını değerlendirdik.
Hindistan'ın Bihar eyaletinin Muzaffarpur bölgesindeki 10 köyden sivrisinek topladık. Sekiz köy yüksek etkilisipermetrinKapalı alan püskürtme için bir köy, kapalı alan püskürtme için yüksek etkili sipermetrin kullanmayı bıraktı ve bir köy, kapalı alan püskürtme için yüksek etkili sipermetrin kullanmayı hiç kullanmadı. Toplanan sivrisinekler, tanımlanmış bir süre boyunca (40 dakika boyunca 3 μg/ml) önceden tanımlanmış bir tanı dozuna maruz bırakıldı ve etkisizleştirme oranı ve ölüm oranı, maruziyetten 24 saat sonra kaydedildi.
Vahşi sivrisineklerin öldürme oranları %91,19 ile %99,47 arasında, F1 nesillerinin ise %91,70 ile %98,89 arasında değişiyordu. Maruziyetten yirmi dört saat sonra, vahşi sivrisineklerin ölüm oranı %89,34 ile %98,93 arasında, F1 nesillerinin ise %90,16 ile %98,33 arasında değişiyordu.
Bu çalışmanın sonuçları, P. argentipes'te direnç gelişebileceğini, eradikasyon sağlandıktan sonra kontrolün sürdürülmesi için sürekli izleme ve teyakkuzun gerekliliğini ortaya koymaktadır.
Visseral leishmaniasis (VL), Hint yarımadasında kala-azar olarak bilinir, kamçılı protozoan Leishmania'nın neden olduğu ve enfekte dişi kum sineklerinin (Diptera: Myrmecophaga) ısırmasıyla bulaşan bir paraziter hastalıktır. Kum sinekleri, Güneydoğu Asya'da VL'nin tek doğrulanmış vektörüdür. Hindistan, VL'yi ortadan kaldırma hedefine ulaşmaya yakındır. Ancak, eradikasyondan sonra düşük insidans oranlarını korumak için, olası bulaşmayı önlemek amacıyla vektör popülasyonunu azaltmak kritik öneme sahiptir.
Güneydoğu Asya'da sivrisinek kontrolü, sentetik böcek ilaçları kullanılarak kapalı alanda kalıntı püskürtme (IRS) yoluyla gerçekleştirilir. Gümüşbacakların gizli dinlenme davranışı, onu kapalı alanda kalıntı püskürtme yoluyla böcek ilacı kontrolü için uygun bir hedef haline getirir [1]. Hindistan'daki Ulusal Sıtma Kontrol Programı kapsamındaki diklorodifeniltrikloroetan (DDT)'ın kapalı alanda kalıntı püskürtmesi, sivrisinek popülasyonlarının kontrolünde ve VL vakalarının önemli ölçüde azaltılmasında önemli taşma etkilerine sahip olmuştur [2]. VL'nin bu planlanmamış kontrolü, Hindistan VL Eradikasyon Programı'nı gümüşbacakların kontrolünün birincil yöntemi olarak kapalı alanda kalıntı püskürtmeyi benimsemeye yöneltti. 2005 yılında Hindistan, Bangladeş ve Nepal hükümetleri, 2015 yılına kadar VL'yi ortadan kaldırma hedefi ile bir mutabakat zaptı imzaladılar [3]. Vektör kontrolü ve insan vakalarının hızlı teşhis ve tedavisinin bir kombinasyonunu içeren eradikasyon çabaları, 2015 yılına kadar konsolidasyon aşamasına girmeyi amaçlıyordu; bu hedef daha sonra 2017 ve ardından 2020 olarak revize edildi. [4] İhmal edilmiş tropikal hastalıkları ortadan kaldırmaya yönelik yeni küresel yol haritası, 2030 yılına kadar VL'nin ortadan kaldırılmasını içeriyor.[5]
Hindistan BCVD'nin eradikasyon sonrası aşamasına girerken, beta-sipermetrin'e karşı önemli bir direnç gelişmemesini sağlamak zorunludur. Direncin nedeni, hem DDT'nin hem de sipermetrinin aynı etki mekanizmasına sahip olması, yani VGSC proteinini hedeflemeleridir[21]. Bu nedenle, kum sineklerinde direnç geliştirme riski, oldukça güçlü sipermetrine düzenli maruz kalmanın neden olduğu stres nedeniyle artabilir. Bu nedenle, bu böcek ilacına dirençli potansiyel kum sineği popülasyonlarını izlemek ve belirlemek zorunludur. Bu bağlamda, bu çalışmanın amacı, Chaubey ve ark. tarafından belirlenen teşhis dozları ve maruz kalma sürelerini kullanarak vahşi kum sineklerinin duyarlılık durumunu izlemekti. [20], Hindistan'ın Bihar eyaletinin Muzaffarpur bölgesindeki farklı köylerden, sipermetrinle muamele edilmiş iç mekan püskürtme sistemlerini sürekli kullanan (sürekli IPS köyleri) P. argentipes'i inceledi. Sipermetrinle muamele edilmiş iç mekan ilaçlama sistemlerini kullanmayı bırakan köylerden (eski IPS köyleri) ve sipermetrinle muamele edilmiş iç mekan ilaçlama sistemlerini hiç kullanmamış olan köylerden (IPS olmayan köyler) elde edilen yabani P. argentipes'in duyarlılık durumu, CDC şişe biyolojik testi kullanılarak karşılaştırıldı.
Çalışma için on köy seçildi (Şekil 1; Tablo 1), bunlardan sekizinde sentetik piretrinlerin (hipermetrin; sürekli hipermetrin köyleri olarak belirlenmiştir) sürekli iç mekanda püskürtülmesi geçmişi vardı ve son 3 yılda VL vakaları (en az bir vaka) vardı. Çalışmadaki kalan iki köyden, beta-sipermetrin için iç mekanda püskürtme yapmayan bir köy (iç mekanda püskürtme yapılmayan köy) kontrol köyü olarak seçildi ve beta-sipermetrin için aralıklı iç mekanda püskürtme yapan diğer köy (aralıklı iç mekanda püskürtme yapan köy/eski iç mekanda püskürtme yapan köy) kontrol köyü olarak seçildi. Bu köylerin seçimi Sağlık Bakanlığı ve İç Mekan Püskürtme Ekibi ile koordinasyona ve Muzaffarpur Bölgesi'ndeki İç Mekan Püskürtme Mikro Eylem Planı'nın doğrulanmasına dayanıyordu.
Çalışmaya dahil edilen köylerin yerlerini gösteren Muzaffarpur bölgesinin coğrafi haritası (1–10). Çalışma yerleri: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Harita QGIS yazılımı (sürüm 3.30.3) ve Açık Değerlendirme Şekil Dosyası kullanılarak hazırlanmıştır.
Maruz kalma deneyleri için şişeler Chaubey ve ark. [20] ve Denlinger ve ark. [22] yöntemlerine göre hazırlandı. Kısaca, deneyden bir gün önce 500 mL'lik cam şişeler hazırlandı ve şişelerin iç duvarı belirtilen böcek ilacı ile kaplandı (α-sipermetrin'in teşhis dozu 3 μg/mL idi) böcek ilacının aseton çözeltisini (2,0 mL) şişelerin tabanına, duvarlarına ve kapağına uygulayarak. Daha sonra her şişe mekanik bir silindir üzerinde 30 dakika kurutuldu. Bu süre zarfında, asetonun buharlaşmasına izin vermek için kapağı yavaşça açın. 30 dakikalık kurutmadan sonra, kapağı çıkarın ve tüm aseton buharlaşana kadar şişeyi döndürün. Daha sonra şişeler bir gece boyunca kurumaya bırakıldı. Her tekrar testi için, kontrol olarak kullanılan bir şişe 2,0 mL aseton ile kaplandı. Tüm şişeler, Denlinger ve ark. tarafından açıklanan prosedüre göre uygun şekilde temizlendikten sonra deneyler boyunca yeniden kullanıldı. ve Dünya Sağlık Örgütü [ 22 , 23 ].
İnsektisit hazırlanmasından sonraki gün, 30-40 vahşi yakalanmış sivrisinek (aç bırakılmış dişiler) kafeslerden şişelerde çıkarıldı ve her şişeye nazikçe üflendi. Kontrol dahil olmak üzere her insektisit kaplı şişe için yaklaşık olarak aynı sayıda sinek kullanıldı. Bunu her köyde en az beş ila altı kez tekrarlayın. İnsektisite 40 dakika maruz kaldıktan sonra, yere serilmiş sinek sayısı kaydedildi. Tüm sinekler mekanik bir aspiratörle yakalandı, ince gözenekli bir pint karton kaplara yerleştirildi ve aynı nem ve sıcaklık koşullarında, aynı besin kaynağıyla (yüzde 30 şeker solüsyonuna batırılmış pamuk topları) tedavi edilmemiş kolonilerle aynı ayrı bir inkübatöre yerleştirildi. Ölüm oranı insektisite maruziyetten 24 saat sonra kaydedildi. Tür kimliğini doğrulamak için tüm sivrisinekler diseke edildi ve incelendi. Aynı prosedür F1 yavru sinekler için de gerçekleştirildi. Yere serme ve ölüm oranları maruziyetten 24 saat sonra kaydedildi. Kontrol şişelerindeki ölüm oranı %5'ten az ise, tekrarlarda ölüm oranı düzeltmesi yapılmadı. Kontrol şişesindeki ölüm oranı ≥ %5 ve ≤ %20 ise, o tekrarın test şişelerindeki ölüm oranı Abbott formülü kullanılarak düzeltildi. Kontrol grubundaki ölüm oranı %20'yi aşarsa, tüm test grubu atıldı [24, 25, 26].
Vahşi yakalanmış P. argentipes sivrisineklerinin ortalama ölüm oranı. Hata çubukları ortalamanın standart hatalarını temsil eder. İki kırmızı yatay çizginin grafikle kesişimi (sırasıyla %90 ve %98 ölüm oranı), direncin gelişebileceği ölüm oranı penceresini gösterir.[25]
Vahşi yakalanmış P. argentipes'in F1 yavrularının ortalama ölüm oranı. Hata çubukları ortalamanın standart hatalarını temsil eder. İki kırmızı yatay çizgiyle kesişen eğriler (sırasıyla %90 ve %98 ölüm oranı) direncin gelişebileceği ölüm oranı aralığını temsil eder[25].
Kontrol/IRS dışı köydeki (Manifulkaha) sivrisineklerin böcek ilaçlarına karşı oldukça hassas olduğu bulundu. Vahşi yakalanan sivrisineklerin, düşürülme ve maruziyetten 24 saat sonra ortalama ölüm oranı (±SE) sırasıyla %99,47 ± 0,52 ve %98,93 ± 0,65 idi ve F1 yavrularının ortalama ölüm oranı sırasıyla %98,89 ± 1,11 ve %98,33 ± 1,11 idi (Tablolar 2, 3).
Bu çalışmanın sonuçları, gümüş bacaklı kum sineklerinin, piretrin (SP) α-sipermetrinin rutin olarak kullanıldığı köylerde sentetik piretrin (SP) α-sipermetrine karşı direnç geliştirebileceğini göstermektedir. Buna karşılık, IRS/kontrol programı kapsamında olmayan köylerden toplanan gümüş bacaklı kum sineklerinin oldukça duyarlı olduğu bulunmuştur. Vahşi kum sineği popülasyonlarının duyarlılığının izlenmesi, kullanılan böcek ilaçlarının etkinliğinin izlenmesi için önemlidir, çünkü bu bilgi böcek ilacı direncinin yönetilmesinde yardımcı olabilir. IRS'nin bu böcek ilacını kullanarak yaptığı tarihsel seçilim baskısı nedeniyle Bihar'ın endemik bölgelerindeki kum sineklerinde düzenli olarak yüksek seviyelerde DDT direnci bildirilmiştir [ 1 ].
P. argentipes'in piretrinlere karşı oldukça hassas olduğunu bulduk ve Hindistan, Bangladeş ve Nepal'deki saha denemeleri, IRS'nin sipermetrin veya deltametrin ile birlikte kullanıldığında yüksek entomolojik etkinliğe sahip olduğunu gösterdi [19, 26, 27, 28, 29]. Son zamanlarda, Roy ve diğerleri [18], P. argentipes'in Nepal'de piretrinlere karşı direnç geliştirdiğini bildirdi. Saha duyarlılık çalışmamız, IRS'ye maruz kalmayan köylerden toplanan gümüş bacaklı kum sineklerinin oldukça hassas olduğunu, ancak aralıklı/eski IRS ve sürekli IRS köylerinden toplanan sineklerin (ölüm oranı %90 ila %97 arasında değişiyordu, ancak Anandpur-Haruni'den gelen kum sinekleri hariç, maruziyetten 24 saat sonra %89,34 ölüm oranına sahipti) oldukça etkili sipermetrine karşı muhtemelen dirençli olduğunu gösterdi [25]. Bu direncin gelişmesinin olası nedenlerinden biri, endemik alanlarda/bloklarda/köylerde kala-azar salgınlarının yönetimi için standart prosedürler olan kapalı alanda rutin ilaçlama (IRS) ve vaka bazlı yerel ilaçlama programlarının uyguladığı baskıdır (Salgın Araştırması ve Yönetimi için Standart İşletim Prosedürü [30]. Bu çalışmanın sonuçları, son derece etkili sipermetrine karşı seçici baskının gelişimine dair erken göstergeler sağlamaktadır. Ne yazık ki, CDC şişe biyolojik deneyi kullanılarak elde edilen bu bölge için tarihsel duyarlılık verileri karşılaştırma için mevcut değildir; önceki tüm çalışmalarda, WHO insektisit emdirilmiş kağıt kullanılarak P. argentipes duyarlılığı izlenmiştir. WHO test şeritlerindeki insektisitlerin tanısal dozları, sıtma vektörlerine (Anopheles gambiae) karşı kullanım için insektisitlerin önerilen tanımlama konsantrasyonlarıdır ve bu konsantrasyonların kum sineklerine operasyonel uygulanabilirliği belirsizdir çünkü kum sinekleri sivrisineklerden daha az sıklıkta uçarlar ve biyolojik deneydeki substratla daha fazla temas halinde kalırlar [23].
Sentetik piretrinler, 1992'den beri Nepal'deki VL endemik bölgelerinde kum sineği kontrolü için SP'ler alfa-sipermetrin ve lambda-sihalotrin ile dönüşümlü olarak kullanılıyor [31] ve deltametrin de 2012'den beri Bangladeş'te kullanılıyor [32]. Uzun süredir sentetik piretrinlerin kullanıldığı bölgelerde gümüş bacaklı kum sineklerinin yabani popülasyonlarında fenotipik direnç tespit edilmiştir [18, 33, 34]. Hint kum sineğinin yabani popülasyonlarında eşanlamlı olmayan bir mutasyon (L1014F) tespit edilmiş ve DDT'ye dirençle ilişkilendirilmiştir; bu, piretrin direncinin moleküler düzeyde ortaya çıktığını, çünkü hem DDT'nin hem de piretrin'in (alfa-sipermetrin) böcek sinir sisteminde aynı geni hedef aldığını göstermektedir [17, 34]. Bu nedenle eradikasyon ve eradikasyon sonrası dönemlerde sipermetrin duyarlılığının sistematik olarak değerlendirilmesi ve sivrisinek direncinin izlenmesi esastır.
Bu çalışmanın olası bir sınırlaması, duyarlılığı ölçmek için CDC şişe biyolojik deneyini kullanmamızdır, ancak tüm karşılaştırmalarda WHO biyolojik deney kiti kullanılarak yapılan önceki çalışmalardan elde edilen sonuçlar kullanılmıştır. İki biyolojik deneyden elde edilen sonuçlar doğrudan karşılaştırılabilir olmayabilir çünkü CDC şişe biyolojik deneyi tanı periyodunun sonunda baskılanmayı ölçerken, WHO kiti biyolojik deneyi maruziyetten 24 veya 72 saat sonraki ölüm oranını ölçmektedir (yavaş etkili bileşikler için ikincisi) [35]. Başka bir olası sınırlama, bu çalışmadaki IRS köylerinin sayısının, bir IRS olmayan ve bir IRS olmayan/eski IRS köyüyle karşılaştırılmasıdır. Bir ilçedeki bireysel köylerde gözlemlenen sivrisinek vektör duyarlılık düzeyinin, Bihar'daki diğer köy ve ilçelerdeki duyarlılık düzeyini temsil ettiğini varsayamayız. Hindistan lösemi virüsünün eliminasyon sonrası fazına girdiğinden, önemli ölçüde direnç gelişimini önlemek zorunludur. Farklı ilçelerden, bloklardan ve coğrafi alanlardan gelen kum sineği popülasyonlarında direncin hızlı bir şekilde izlenmesi gerekmektedir. Bu çalışmada sunulan veriler ön verilerdir ve düşük kum sineği popülasyonlarını korumak ve lösemi virüsünün ortadan kaldırılmasını desteklemek için vektör kontrol programlarını değiştirmeden önce, bu alanlarda P. argentipes'in duyarlılık durumu hakkında daha spesifik bir fikir edinmek için Dünya Sağlık Örgütü [35] tarafından yayınlanan tanımlama konsantrasyonlarıyla karşılaştırılarak doğrulanmalıdır.
Leukosis virüsünün vektörü olan sivrisinek P. argentipes, oldukça etkili sipermetrin'e karşı erken direnç belirtileri göstermeye başlayabilir. Vektör kontrol müdahalelerinin epidemiyolojik etkisini sürdürmek için P. argentipes'in vahşi popülasyonlarında böcek ilacı direncinin düzenli olarak izlenmesi gerekir. Farklı etki biçimlerine sahip böcek ilaçlarının rotasyonu ve/veya yeni böcek ilaçlarının değerlendirilmesi ve kaydı, böcek ilacı direncini yönetmek ve Hindistan'da leukosis virüsünün ortadan kaldırılmasını desteklemek için gerekli ve önerilir.
Gönderi zamanı: 17-Şub-2025