Hint yarımadasında kala-azar olarak bilinen visseral leishmaniasis (VL), kamçılı protozoan Leishmania'nın neden olduğu ve derhal tedavi edilmezse ölümcül olabilen paraziter bir hastalıktır. Kum sineği Phlebotomus argentipes, Güneydoğu Asya'da VL'nin doğrulanmış tek vektörüdür ve burada sentetik bir insektisit olan iç mekan kalıntı püskürtme (IRS) ile kontrol edilir. VL kontrol programlarında DDT kullanımı, kum sineklerinde direnç gelişmesine neden olduğundan, DDT'nin yerini alfa-sipermetrin adlı insektisit almıştır. Ancak alfa-sipermetrin, DDT'ye benzer şekilde etki eder, bu nedenle kum sineklerinde direnç riski, bu insektisitin tekrarlanan maruziyetinin neden olduğu stres altında artar. Bu çalışmada, CDC şişe biyolojik analizini kullanarak yabani sivrisineklerin ve F1 yavrularının duyarlılığını değerlendirdik.
Hindistan'ın Bihar eyaletinin Muzaffarpur bölgesindeki 10 köyden sivrisinek topladık. Sekiz köyde yüksek etkili ilaçlar kullanılmaya devam edildi.sipermetrinİç mekan ilaçlamasında bir köy, yüksek etkili sipermetrin kullanımını bıraktı ve bir köy ise yüksek etkili sipermetrin kullanımını hiç kullanmadı. Toplanan sivrisinekler, önceden belirlenmiş bir teşhis dozuna belirli bir süre (40 dakika boyunca 3 μg/ml) maruz bırakıldı ve etkisizleştirme oranı ve ölüm oranı, maruziyetten 24 saat sonra kaydedildi.
Yabani sivrisineklerin öldürme oranları %91,19 ile %99,47 arasında, F1 nesillerinin ise %91,70 ile %98,89 arasında değişmiştir. Maruziyetten 24 saat sonra yabani sivrisineklerin ölüm oranı %89,34 ile %98,93 arasında, F1 nesillerinin ölüm oranı ise %90,16 ile %98,33 arasında değişmiştir.
Bu çalışmanın sonuçları P. argentipes'te direnç gelişebileceğini ve eradikasyon sağlandıktan sonra kontrolün sürdürülmesi için sürekli izleme ve teyakkuzun gerekliliğini ortaya koymaktadır.
Hint yarımadasında kala-azar olarak bilinen viseral leishmaniasis (VL), kamçılı protozoa Leishmania'nın neden olduğu ve enfekte dişi kum sineklerinin (Diptera: Myrmecophaga) ısırmasıyla bulaşan parazitik bir hastalıktır. Kum sinekleri, Güneydoğu Asya'da VL'nin doğrulanmış tek vektörü konumundadır. Hindistan, VL'yi ortadan kaldırma hedefine ulaşmaya yakındır. Ancak, eradikasyondan sonra düşük insidans oranlarını korumak için, olası bulaşmayı önlemek amacıyla vektör popülasyonunu azaltmak kritik öneme sahiptir.
Güneydoğu Asya'da sivrisinek kontrolü, sentetik insektisitler kullanılarak iç mekan kalıntı püskürtme (IRS) yoluyla gerçekleştirilir. Gümüşbacakların gizli dinlenme davranışı, onları iç mekan kalıntı püskürtme yoluyla insektisit kontrolü için uygun bir hedef haline getirir [1]. Hindistan'daki Ulusal Sıtma Kontrol Programı kapsamında iç mekanda diklorodifeniltrikloroetan (DDT) kalıntı püskürtme, sivrisinek popülasyonlarının kontrolünde ve VL vakalarının önemli ölçüde azaltılmasında önemli yayılma etkilerine sahip olmuştur [2]. VL'nin bu plansız kontrolü, Hindistan VL Eradikasyon Programı'nı gümüşbacakların birincil kontrol yöntemi olarak iç mekan kalıntı püskürtmeyi benimsemeye yöneltmiştir. 2005 yılında Hindistan, Bangladeş ve Nepal hükümetleri, VL'yi 2015 yılına kadar ortadan kaldırmayı hedefleyen bir mutabakat zaptı imzalamıştır [3]. Vektör kontrolü ve insan vakalarının hızlı teşhis ve tedavisinin bir kombinasyonunu içeren eradikasyon çabaları, 2015 yılına kadar konsolidasyon aşamasına girmeyi amaçlamış olup, bu hedef daha sonra 2017 ve ardından 2020 olarak revize edilmiştir. [4] İhmal edilmiş tropikal hastalıkları ortadan kaldırmaya yönelik yeni küresel yol haritası, 2030 yılına kadar VL'nin ortadan kaldırılmasını içeriyor.[5]
Hindistan BCVD'nin eradikasyon sonrası aşamasına girerken, beta-sipermetrine karşı önemli bir direnç gelişmemesini sağlamak zorunludur. Direncin nedeni, hem DDT'nin hem de sipermetrinin aynı etki mekanizmasına sahip olması, yani VGSC proteinini hedeflemeleridir [21]. Bu nedenle, kum sineklerinde direnç geliştirme riski, oldukça güçlü sipermetrine düzenli maruz kalmanın neden olduğu stresle artabilir. Bu nedenle, bu insektisite karşı dirençli potansiyel kum sineği popülasyonlarını izlemek ve belirlemek zorunludur. Bu bağlamda, bu çalışmanın amacı, Chaubey ve ark. tarafından belirlenen teşhis dozları ve maruz kalma sürelerini kullanarak yabani kum sineklerinin duyarlılık durumunu izlemekti [20], sürekli olarak sipermetrin ile muamele edilmiş iç mekan püskürtme sistemleri kullanan (sürekli IPS köyleri) Hindistan'ın Bihar eyaletinin Muzaffarpur bölgesindeki farklı köylerden P. argentipes'i inceledi. Sipermetrinle muamele edilmiş iç mekan ilaçlama sistemlerini kullanmayı bırakan köylerden (eski IPS köyleri) ve sipermetrinle muamele edilmiş iç mekan ilaçlama sistemlerini hiç kullanmamış olan köylerden (IPS olmayan köyler) elde edilen yabani P. argentipes'in duyarlılık durumu, CDC şişe biyolojik testi kullanılarak karşılaştırıldı.
Çalışma için on köy seçildi (Şekil 1; Tablo 1), bunlardan sekizinde sentetik piretrinlerin (hipermetrin; sürekli hipermetrin köyleri olarak belirlenmiştir) sürekli iç mekanda püskürtülmesi geçmişi vardı ve son 3 yılda VL vakaları (en az bir vaka) vardı. Çalışmadaki kalan iki köyden, beta-sipermetrin için iç mekanda püskürtme yapmayan bir köy (iç mekanda püskürtme yapılmayan köy) kontrol köyü olarak seçildi ve beta-sipermetrin için aralıklı iç mekan püskürtmesi yapan diğer köy (aralıklı iç mekanda püskürtme yapan köy/eskiden iç mekanda püskürtme yapan köy) kontrol köyü olarak seçildi. Bu köylerin seçimi, Sağlık Bakanlığı ve İç Mekan Püskürtme Ekibi ile koordinasyon ve Muzaffarpur Bölgesi'ndeki İç Mekan Püskürtme Mikro Eylem Planı'nın doğrulanmasına dayanıyordu.
Çalışmaya dahil edilen köylerin konumlarını gösteren Muzaffarpur ilçesinin coğrafi haritası (1–10). Çalışma konumları: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Harita, QGIS yazılımı (sürüm 3.30.3) ve Açık Değerlendirme Şekil Dosyası kullanılarak hazırlanmıştır.
Maruz kalma deneyleri için şişeler Chaubey ve ark. [20] ve Denlinger ve ark. [22] yöntemlerine göre hazırlandı. Kısaca, 500 mL'lik cam şişeler deneyden bir gün önce hazırlandı ve şişelerin iç duvarı belirtilen insektisit ile kaplandı (α-sipermetrin'in teşhis dozu 3 μg/mL idi) şişelerin tabanına, duvarlarına ve kapağına insektisitin aseton çözeltisi (2,0 mL) uygulanarak. Daha sonra her şişe mekanik bir silindir üzerinde 30 dakika kurutuldu. Bu süre zarfında, asetonun buharlaşmasına izin vermek için kapağı yavaşça açın. 30 dakikalık kurutmanın ardından kapağı çıkarın ve tüm aseton buharlaşana kadar şişeyi döndürün. Daha sonra şişeler bir gece boyunca kurumaya bırakıldı. Her tekrar testi için, kontrol olarak kullanılan bir şişe 2,0 mL aseton ile kaplandı. Tüm şişeler, Denlinger ve ark. tarafından açıklanan prosedüre göre uygun şekilde temizlendikten sonra deneyler boyunca yeniden kullanıldı. ve Dünya Sağlık Örgütü [ 22 , 23 ].
İnsektisit hazırlanmasından sonraki gün, 30-40 vahşi yakalanmış sivrisinek (aç bırakılmış dişiler) kafeslerden şişelerde çıkarıldı ve her şişeye hafifçe üflendi. Kontrol de dahil olmak üzere, her insektisit kaplı şişe için yaklaşık olarak aynı sayıda sinek kullanıldı. Bu işlemi her köyde en az beş ila altı kez tekrarlayın. İnsektisite 40 dakika maruz kaldıktan sonra, etkisiz hale getirilen sinek sayısı kaydedildi. Tüm sinekler mekanik bir aspiratörle yakalandı, ince gözenekli bir pint karton kaplara yerleştirildi ve aynı nem ve sıcaklık koşullarında, aynı besin kaynağıyla (yüzde 30 şeker çözeltisine batırılmış pamuk topları) ayrı bir inkübatöre yerleştirildi. Ölüm oranı insektisite maruziyetten 24 saat sonra kaydedildi. Tür kimliğini doğrulamak için tüm sivrisinekler diseke edildi ve incelendi. Aynı işlem F1 yavru sinekleri için de gerçekleştirildi. Etkisiz hale getirme ve ölüm oranları maruziyetten 24 saat sonra kaydedildi. Kontrol şişelerindeki ölüm oranı %5'ten az ise, tekrarlarda ölüm oranı düzeltmesi yapılmadı. Kontrol şişesindeki ölüm oranı ≥ %5 ve ≤ %20 ise, aynı tekrarın test şişelerindeki ölüm oranı Abbott formülü kullanılarak düzeltildi. Kontrol grubundaki ölüm oranı %20'yi aşarsa, tüm test grubu atıldı [24, 25, 26].
Doğadan yakalanan P. argentipes sivrisineklerinin ortalama ölüm oranı. Hata çubukları, ortalamanın standart hatalarını temsil eder. İki kırmızı yatay çizginin grafikle kesişimi (sırasıyla %90 ve %98 ölüm oranı), direncin gelişebileceği ölüm oranını gösterir.[25]
Doğadan yakalanan P. argentipes'in F1 yavrularının ortalama ölüm oranı. Hata çubukları, ortalamanın standart hatalarını temsil eder. İki kırmızı yatay çizgiyle kesişen eğriler (sırasıyla %90 ve %98 ölüm oranı), direncin gelişebileceği ölüm oranı aralığını temsil eder[25].
Kontrol/IRS dışı köydeki (Manifulkaha) sivrisineklerin insektisitlere karşı oldukça hassas olduğu tespit edildi. Doğadan yakalanan sivrisineklerin, imha ve maruziyetten 24 saat sonra ortalama ölüm oranı (±SE) sırasıyla %99,47 ± 0,52 ve %98,93 ± 0,65 iken, F1 yavrularının ortalama ölüm oranı sırasıyla %98,89 ± 1,11 ve %98,33 ± 1,11 olarak bulundu (Tablo 2, 3).
Bu çalışmanın sonuçları, gümüş bacaklı kum sineklerinin, piretrin (SP) α-sipermetrin'in rutin olarak kullanıldığı köylerde sentetik piretrin (SP) α-sipermetrine karşı direnç geliştirebileceğini göstermektedir. Buna karşılık, IRS/kontrol programı kapsamında olmayan köylerden toplanan gümüş bacaklı kum sineklerinin oldukça duyarlı olduğu bulunmuştur. Yabani kum sineği popülasyonlarının duyarlılığının izlenmesi, kullanılan böcek ilaçlarının etkinliğinin izlenmesi açısından önemlidir, çünkü bu bilgi böcek ilacı direncinin yönetilmesine yardımcı olabilir. IRS'nin bu böcek ilacını kullanarak yaptığı tarihsel seçilim baskısı nedeniyle, Bihar'ın endemik bölgelerindeki kum sineklerinde düzenli olarak yüksek seviyelerde DDT direnci bildirilmiştir [ 1 ].
P. argentipes'in piretrinlere karşı oldukça hassas olduğunu bulduk ve Hindistan, Bangladeş ve Nepal'deki saha denemeleri, IRS'nin sipermetrin veya deltametrin ile birlikte kullanıldığında yüksek entomolojik etkinliğe sahip olduğunu gösterdi [19, 26, 27, 28, 29]. Son zamanlarda, Roy ve ark. [18], P. argentipes'in Nepal'de piretrinlere direnç geliştirdiğini bildirdi. Saha duyarlılık çalışmamız, IRS'ye maruz kalmayan köylerden toplanan gümüş bacaklı kum sineklerinin oldukça duyarlı olduğunu, ancak aralıklı/eski IRS ve sürekli IRS köylerinden toplanan sineklerin (ölüm oranı %90 ila %97 arasında değişiyordu, Anandpur-Haruni'den gelen kum sinekleri hariç, maruziyetten 24 saat sonra %89,34 ölüm oranına sahipti) oldukça etkili sipermetrine karşı muhtemelen dirençli olduğunu gösterdi [25]. Bu direncin gelişmesinin olası nedenlerinden biri, endemik alanlarda/bloklarda/köylerde kala-azar salgınlarının yönetimi için standart prosedürler olan iç mekan rutin püskürtme (IRS) ve vaka bazlı yerel püskürtme programlarının uyguladığı baskıdır (Salgın Araştırması ve Yönetimi için Standart İşletim Prosedürü [30]. Bu çalışmanın sonuçları, oldukça etkili sipermetrine karşı seçici baskının gelişimine dair erken göstergeler sağlamaktadır. Ne yazık ki, CDC şişe biyolojik deneyi kullanılarak elde edilen bu bölge için tarihsel duyarlılık verileri karşılaştırma için mevcut değildir; önceki tüm çalışmalar, WHO insektisit emdirilmiş kağıt kullanarak P. argentipes duyarlılığını izlemiştir. WHO test şeritlerindeki insektisitlerin tanısal dozları, sıtma vektörlerine (Anopheles gambiae) karşı kullanım için önerilen insektisit tanımlama konsantrasyonlarıdır ve bu konsantrasyonların kum sineklerine operasyonel uygulanabilirliği belirsizdir çünkü kum sinekleri sivrisineklerden daha az sıklıkta uçarlar ve biyolojik deneydeki substratla daha fazla temas halinde kalırlar [23].
Sentetik piretrinler, 1992'den beri Nepal'deki VL endemik bölgelerinde kum sineği kontrolü için SP'ler alfa-sipermetrin ve lambda-sihalotrin ile dönüşümlü olarak kullanılmaktadır [31] ve deltametrin de 2012'den beri Bangladeş'te kullanılmaktadır [32]. Fenotipik direnç, sentetik piretrinlerin uzun süredir kullanıldığı bölgelerdeki gümüş bacaklı kum sineği yabani popülasyonlarında tespit edilmiştir [18, 33, 34]. Hint kum sineğinin yabani popülasyonlarında eşanlamlı olmayan bir mutasyon (L1014F) tespit edilmiş ve DDT'ye dirençle ilişkilendirilmiştir; bu, hem DDT'nin hem de piretrin (alfa-sipermetrin) böcek sinir sisteminde aynı geni hedef aldığı için piretrin direncinin moleküler düzeyde ortaya çıktığını düşündürmektedir [17, 34]. Bu nedenle eradikasyon ve eradikasyon sonrası dönemlerde sipermetrin duyarlılığının sistematik olarak değerlendirilmesi ve sivrisinek direncinin izlenmesi esastır.
Bu çalışmanın olası bir sınırlaması, duyarlılığı ölçmek için CDC şişe biyolojik deneyini kullanmamızdır; ancak tüm karşılaştırmalarda WHO biyolojik deney kiti kullanılarak yapılan önceki çalışmalardan elde edilen sonuçlar kullanılmıştır. İki biyolojik deneyden elde edilen sonuçlar doğrudan karşılaştırılabilir olmayabilir çünkü CDC şişe biyolojik deneyi tanı döneminin sonundaki düşüşü ölçerken, WHO kiti biyolojik deneyi maruziyetten 24 veya 72 saat sonraki ölüm oranını ölçmektedir (yavaş etkili bileşikler için ikincisi) [35]. Bir diğer olası sınırlama ise bu çalışmadaki IRS köylerinin sayısının, bir IRS olmayan ve bir IRS olmayan/eski IRS köyüne kıyasla olmasıdır. Bir bölgedeki bireysel köylerde gözlemlenen sivrisinek vektör duyarlılık düzeyinin, Bihar'daki diğer köy ve bölgelerdeki duyarlılık düzeyini temsil ettiğini varsayamayız. Hindistan lösemi virüsünün eliminasyon sonrası fazına girdiğinden, önemli ölçüde direnç gelişimini önlemek zorunludur. Farklı bölgelerden, bloklardan ve coğrafi alanlardan gelen kum sineği popülasyonlarında direncin hızlı bir şekilde izlenmesi gerekmektedir. Bu çalışmada sunulan veriler ön verilerdir ve düşük kum sineği popülasyonlarını korumak ve lösemi virüsünün yok edilmesini desteklemek için vektör kontrol programlarını değiştirmeden önce, bu alanlarda P. argentipes'in duyarlılık durumu hakkında daha spesifik bir fikir edinmek amacıyla Dünya Sağlık Örgütü [35] tarafından yayınlanan tanımlama konsantrasyonlarıyla karşılaştırılarak doğrulanmalıdır.
Lökozis virüsünün vektörü olan sivrisinek P. argentipes, oldukça etkili sipermetrine karşı erken direnç belirtileri göstermeye başlayabilir. Vektör kontrol müdahalelerinin epidemiyolojik etkisini sürdürmek için, P. argentipes'in yabani popülasyonlarında insektisit direncinin düzenli olarak izlenmesi gerekmektedir. Farklı etki mekanizmalarına sahip insektisitlerin rotasyonu ve/veya yeni insektisitlerin değerlendirilmesi ve tescili, insektisit direncini yönetmek ve Hindistan'da lökozis virüsünün ortadan kaldırılmasını desteklemek için gerekli ve önerilmektedir.
Gönderim zamanı: 17 Şubat 2025